菜豆环氧水解酶归一性水解间硝基环氧苯乙烷的研究

更新时间:2023-05-28

【摘要】旨在研究菜豆环氧水解酶PvEH2对映归一性水解外消旋（rac-）间硝基环氧苯乙烷（mNSO）的特性,为制备光学纯（R）-间硝基苯乙二醇（mNPED）提供优良的生物催化剂。构建表达有重组PvEH2的工程茵E.coli/pveh2。以rac-mNSO为底物,借助手性色谱法分析E.coli/pveh2全细胞的EH活性和区域选择性。基于有机助溶剂种类和剂量对酶活性的影响,筛选并优化缓冲液/助溶剂反应体系。结果显示,在菜豆植株中,PvEH2基因的转录水平可能受体外环境诱导因素的影响。E.colil/pveh2的EH活性为15.4 U/g干细胞,水解反应的区域选择性系数αs和βR分别为90.3%和96.4%。在经过筛选优化的含有5%（V/V）丙三醇的磷酸盐缓冲液中,最高底物浓度为40 mmol/L,是原缓冲液体系的4倍。当反应至12h时,所得（R）-mNPED的光学纯度eep及产率分别为84.9%和90.2%。E.coli/pveh2或PvEH2在水解rac-mNSO中表现出优秀的区域选择性,在制备光学纯（R）-mNPED中具有较好的应用潜力。

【关键词】 环氧水解酶 对映归一性水解 间硝基环氧苯乙烷 间硝基苯乙二醇

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